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篇 实验技术与原理

章 生物大分子样品制备

节 材料的选择与处理

第二节 细胞破碎

第三节 抽提

第四节 浓缩与纯化

第五节 样品保存

第六节 制备方案设计与评价

第二章 离心技术

节 基本原理

第二节 离心机的主要构造和类型

第三节 差速离心法

第四节 密度梯度离心法

第五节 分析超离心

第三章 层析技术

节 基本原理

第二节 吸附层析

第三节 疏水层析

第四节 离子交换层析

第五节 凝胶过滤层析

第六节 亲和层析

第四章 电泳技术

节 基本原理

第二节 醋酸纤维素薄膜电泳

第三节 聚丙烯凝酰胺胶电泳

第四节 印迹法(转移电泳)

第五节 毛细管电泳

第六节 琼脂糖凝胶电泳

第五章 分光光度法

节 基本原理

第二节 紫外一可见光光度法

第三节 荧光光谱分析法

第六章 分子克隆技术

节 基本原理

第二节 基因片段制备

第三节 质粒DNA制备

第四节 DNA重组

第七章 克隆化基因的表达与检测技术

节 基本原理

第二节 外源基因在原核系统中的表达

第三节 外源基因在真核系统中的表达

第四节 蛋白质western blot检测

第八章 核酸分子杂交

节 基本原理

第二节 核酸探针的制备和标记

第三节 Solnhern印记

第四节 Northern印记

第九章 聚合酶链反应(PCR)技术

节 基本原理

第二节 原位PCR

第三节 逆转录PCR

第四节 实时定量PCR

第五节 甲基化PCR

第二篇 基础实验操作

第十章 蛋白质

实验一 从牛奶中分离酪蛋白

实验二 蛋白质的定量测定

实验三 血清蛋白质的电泳分离

实验四 SDS—PAGE测定蛋白质相对分子量

实验五 离子交换层析分离混合氨基酸

第十一章 核 酸

实验六 人外周血基因组DNA提取

实验七 肝脏RNA提取(苯酚法)

实验八 核酸的定量测定(定磷法、紫外吸收法)

实验九 琼脂糖凝胶电泳分离DNA

实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离RNA

实验十一 人基因组DNA多态性分析

第十二章 酶

实验十二 胰蛋白酶的分离纯化

实验十三 酸性磷酸酶Km和Vmax值测定

实验十四 唾液淀粉酶的 适pH测定

实验十五 乳酸脱氢酶同工酶分析

第十三章 物质代谢

实验十六 激素对血糖的调节作用

实验十七 转氨基作用(纸层析法)

实验十八 肌糖原酵解作用

实验十九 血清谷丙转氨酶(SGPT)活性测定(King氏法)

实验二十 脂肪酸的β-氧化作用

第十四章 分子生物学实验

实验二十一 质粒DNA的提取

实验二十二 DNA酶切及片段回收

实验二十三 PCR体外扩增目的基因

实验二十四 反转录PCR(RT—PCR)

实验二十五 大肠杆菌感受态细胞制备

实验二十六 重组质粒连接、转化与筛选

实验二十七 Southern杂交

实验二十八 Northern杂交

实验二十九 外源基因的诱导表达

实验三十 蛋白质印迹法检测蛋白

实验三十一 乙型肝炎的PCR诊断

第三篇 设计性实验

第十五章 设计性实验概述

节 背景介绍

第二节 基本类型和要素

第三节 组织实施

第十六章 实验选题和设计

节 实验选题

第二节 实验设计

第十七章 数据处理与论文撰写

节 结果观察与记录

第二节 数据处理与分析

第三节 实验报告的撰写

第四节 科研论文的撰写

第十八章 实施案例

节 设计性实验技术模块

第二节 设计性实验案例

附 录

参考文献

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